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Mohammed Abdelsabour-Khalaf

• The formation of the primary urine occurs at the filtration barrier, composed of fenestrated endothelia, glomerular basement membrane and the podocyte foot processes. A molecular sheet of transmembrane proteins extends between the adjacent foot processes forming the slit diaphragm. The integrity of the slit diaphragm is important for filtration. In this work, immortalized human podocytes were used to study the interaction of these slit diaphragm genes and proteins following silencing of podocyte specific genes \(\it Neph1\), \(\it Neph2\) and \(\it Atoh8\) by RNAi. Silencing \(\it Neph1\) led to a redistribution of the nephrin protein in the cytoplasm of the podocyte, while \(\it Atoh8\) RNAi caused decrease expression of \(\it Neph1\), \(\it Neph2\), \(\it Zo1\), \(\it Nphs1\) and \(\it Nphs2\). \(\it Neph2\) RNAi lead to an increase of nephrin expression. No effects were recorded after \(\it Neph1\) and \(\it Neph2\) RNAi on podocin expression. But, \(\it Atoh8\) RNAi caused decrease in podocin. I also show the expression of podocyte-specific genes in the developing chicken embryo.
• Die Bildung des Primärharns findet an der Filtrationsbarriere statt, bestehend aus fenestriertem Endothel, glomerulärer Basalmembran und Fußfortsätzen der Podozyten. Eine molekulare Schicht von Transmembranproteinen spannt sich zwischen benachbarten Fußfortsätzen und formt das Schlitzdiaphragma. Die Integrität des Schlitzdiaphragmas ist wichtig für die Filtration. Es wurden immortalisierte Podozytenzellen benutzt, um die Interaktion der Gene und Proteine des Schlitzdiaphragmas nach Stummschaltung der Podozyten-spezifischen Gene \(\it Neph1\), \(\it Neph2\) und \(\it Atoh8\) mittels RNAi zu untersuchen. Stummschaltung von \(\it Neph1\) führte zur Rückverteilung des Nephrinproteins ins Zytoplasma der Podozyten, während \(\it Atoh8\)-RNAi die Expression von \(\it Neph1\), (\it Neph2\), \(\it Zo1\), \(\it Nphs1\) und \(\it Nphs2\) verringerte. \(\it Neph2\)-RNAi führte zu verstärkter Nephrin Expression. Keine Effekte auf die Podocin Expression wurden nach \(\it Neph1\)- und \(\it Neph2\)-RNAi verzeichnet, während \(\it Atoh8\)-RNAi zur Verringerung von Podocin führte. Weiterhin wurde die Expression der Podozyten-spezifischen Gene im Hühnerembryo gezeigt.