Analytik von homologen P450-Proteinen in humaner Leber mittels Tripel-Quadrupol-Massenspektrometrie
- Für die differentielle Proteomstudie humaner Hepatozyten wurde zweidimensionale CTAB-SDS-PAGE nach Helling \(\textit {et al.}\) verwendet. Die Auflösung der erhaltenen Gele war zu gering, um eine Auswertung durchzuführen. Es wurde versucht, ein System für Elektrophorese in Gegenwart kationischer Detergentien auf Grundlage der Theorie von Jovin zu entwickeln. Die Auflösung dieser Gele war gut, Schwierigkeiten bei der Skalierung auf Großgele für eine differentielle Studie führten zur Einstellung des Projekts. Die gezielte Analyse von P450-Proteinen wurde mittels Tripel-Quadrupol-Massen-Spektrometrie (QqQ-MS) durchgeführt. Der gleichzeitige, spezifische Nachweis der Proteine der Familien CYP2C*, CYP3A* in humaner Leber mittels isoformspezifischer Peptide ist gelungen. CYP2D6 wurde in Lebermikrosomen mit der AQUA-Methode von Gerber \(\textit {et al.}\) quantifiziert. Die Methode wurde validiert, die erhaltenen Ergebnisse erfolgreich mit kinetischen Daten und quantitativem Western-Blott verglichen.
Author: | Elmar LangenfeldGND |
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URN: | urn:nbn:de:hbz:294-21974 |
Referee: | Helmut E. MeyerGND, William S. SheldrickGND |
Document Type: | Doctoral Thesis |
Language: | German |
Date of Publication (online): | 2008/04/16 |
Date of first Publication: | 2008/04/16 |
Publishing Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek |
Granting Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Fakultät für Chemie und Biochemie |
Date of final exam: | 2008/02/29 |
Creating Corporation: | Fakultät für Chemie und Biochemie |
GND-Keyword: | Cytochrom P-450; Mehrfachhandlung; Systembiologie; Gemisch; Isotopenmarkierung |
Institutes/Facilities: | Medizinisches Proteom-Center |
Dewey Decimal Classification: | Naturwissenschaften und Mathematik / Biowissenschaften, Biologie, Biochemie |
faculties: | Fakultät für Chemie und Biochemie |
Licence (German): | Keine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht |