Klonierung und Sequenzierung des Ssp (\(\textit {S. saprophyticus surface-associated protein}\)) und Identifizierung des Proteins als eine oberflächenassoziierte Lipase
- Das \(\textit {Staphylococcus saprophyticus surface-associated protein}\) (Ssp) ist ein fibrilläres, leicht ablösbares Oberflächenprotein, das von klinischen \(\textit {S. saprophyticus}\)-Isolaten produziert wird. Im Rahmen dieser Arbeit wurde es kloniert und als eine Lipase identifiziert. Es wurde eine Phagen-Genbibliothek von \(\textit {S. saprophyticus}\) mittels Plaque-Hybridisierung und mittels eines Antikörper-Screening durchsucht. Diese Klonierungsansätze blieben erfolglos. Das Protein wurde anschließend einem proteolytischen Partialverdau unterzogen und das dabei erhaltene Fragment N terminal sequenziert. Mit zwei degenerierten Primern konnte eine PCR durchgeführt und die dabei erhaltene Teilsequenz mittels weiterer Versuche vervollständigt werden. Die aus einem Sequenzvergleich theoretisch hergeleitete Funktion des Proteins wurde experimentell belegt. Dabei wurde das \(\it ssp\)-Gen in einen Lipase-negativen Staphylokokken- sowie \(\textit {E. coli}\)-Stamm transformiert und diesen dadurch eine lipolytische Aktivität verliehen.
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| Author: | Magdalena Patrycja Woznowski |
|---|---|
| URN: | urn:nbn:de:hbz:294-15435 |
| Referee: | Sören GatermannGND, Wolfgang SchliebsGND |
| Document Type: | Doctoral Thesis |
| Language: | German |
| Date of Publication (online): | 2006/02/27 |
| Date of first Publication: | 2006/02/27 |
| Publishing Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek |
| Granting Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Medizinische Fakultät |
| Date of final exam: | 2006/02/07 |
| Creating Corporation: | Medizinische Fakultät |
| GND-Keyword: | Harnwegsinfektion; Proteasen; Staphylococcus; Lipide; Proteine |
| Institutes/Facilities: | Institut für Hygiene und Mikrobiologie, Abteilung für Medizinische Mikrobiologie |
| Dewey Decimal Classification: | Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften / Medizin, Gesundheit |
| Licence (German): |  Keine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht |
