Funktionelle und strukturelle Charakterisierung von Ras-Effektoren
- Die Ras-Bindungsdomäne (RBD) von Nore1 ist mit 160° Aminosäuren die bisher größte bekannte RBD. Durch Modellierungen von Nore1-RBD mit RalGDS-RBD als Vorlage wurden Mutationskandidaten identifiziert, die durch Punktmutationen im Vergleich mit anderen RBDs charakterisiert wurden. Die Nore1-RBD kristallisierte als K302D-Mutante mit Ras (1-166) GppNHp (D30E/E31K). Es wurden sehr gute (2,5 AA Auflösung) und vollständige Datensätze gesammelt. \(\textit {In vitro}\) wurde für zwei mögliche Interaktionspartner von Nore1 die Bindung quantifiziert. So binden MSS4 (Austauschfaktor von Rab3a) und Map1B (microtubulusassoziiertes Protein des Cytoskeletts) an die Nore1-RBD. Die Coiled Coil-Domäne (CC) von Nore1 wurde kristallisiert und die Struktur röntgenkristallographisch gelöst. Es ergab sich ein antiparalleles linksgängiges CC-Supercoildimer. Durch ITC-Messungen konnte die Komplexbildungskonstante bestimmt werden. Ein Modell zur Aktivierung einer S/T-Kinase (MST1) durch Nore1-CC wurde aufgestellt.
Author: | Daniel Schwarz |
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URN: | urn:nbn:de:hbz:294-7106 |
Subtitle (German): | Eigenschaften des kleinen Ras-Effektors Novel Ras Effector 1 (Nore1) |
Referee: | Alfred WittinghoferGND, Andrea BlöchlGND |
Document Type: | Doctoral Thesis |
Language: | German |
Date of Publication (online): | 2003/04/14 |
Date of first Publication: | 2003/04/14 |
Publishing Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek |
Granting Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Fakultät für Chemie und Biochemie |
Date of final exam: | 2003/02/11 |
Creating Corporation: | Fakultät für Chemie und Biochemie |
GND-Keyword: | Apoptosis; Yeast-Two-Hybrid-System; Isothermes Kalorimeter / Titration; Helix-Knäuel-Umwandlung; Protein-Serin-Threonin-Kinasen |
Dewey Decimal Classification: | Naturwissenschaften und Mathematik / Chemie, Kristallographie, Mineralogie |
Licence (German): | Keine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht |