Molekulare Analyse der Biosynthese octadecanoid-abgeleiteter Signalmoleküle durch Allenoxid-Synthase und Allenoxid-Cyclase aus\(\it Arabidopsis thaliana\) (L.) HEYNH.
Molecular analysis of the biosynthesis of octadecanoid-derived signalling molecules by allene oxide synthase and allene oxide cyclase from \(\it Arabidopsis thaliana\) (L.) HEYNH.
- Im Fokus dieser Dissertation stand die Untersuchung der Biosynthese des Phytohormons 12-oxo-Phytodiensäure durch die Allenoxid-Synthase (AOS) und die vier Allenoxid-Cyclase-Isoformen (AOC) aus \(\it Arabidopsis thaliana\). Enzymatische Analysen der rekombinanten Proteine zeigten eine redundante Substratspezifität der AOC-Isoformen. Zudem belegen biochemische Interaktionsstudien, dass eine Komplexierung von AOS und AOC {\it in vitro} nicht essentiell ist. Gleichwohl lässt die erhöhte Stereoselektivität der Reaktion bei geringer Distanz der Proteine eine Kooperation der Enzyme \(\it in planta\) vermuten. Diese Annahme wird durch die chloroplastidäre Lokalisation von AOS- und AOC:EGFP-Fusionsproteinen gestützt. Weiterhin wurde die Kristallstruktur der AOC2 mittels \(\it de-novo\)-Röntgenstrukturanalyse aufgeklärt. Darauf basierend konnte der molekulare Mechanismus der enzymatischen Zyklisierungsreaktion gefolgert und durch enzymatische sowie kristallographische Analyse von AOC2-Punktmutanten verifiziert werden.