Heterologe Expression und biophysikalische Untersuchung von Struktur/Funktionsbeziehungen 7fach transmembranspannender Proteine
- Bakteriorhodopsin und der \(\beta_{2}\)-adrenerge Rezeptor sind Membranproteine mit sieben Transmembranhelizes. Um die genaue Funktion dieser Proteine zu verstehen, sind biochemische und biophysikalische Untersuchungen nötig. Verschiedene Bakteriorhodopsinmutanten wurden in kubischen Lipidphasen kristallisiert und die Strukturmodelle durch Röntgenstrukturanalyse erstellt. Mutationen an der Aminosäureposition 194 oder 204 auf der Protonenabgabeseite des Bakteriorhodopsins führen zu einem Verlust der Funktionalität des Proteins, was mit Hilfe der Modelle strukturell gedeutet werden konnte. Der \(\beta_{2}\)-adrenerge Rezeptor konnte heterolog in \(\textit {Escherichia coli}\) exprimiert und chromatographisch gereinigt werden. Das Protein ist nahezu 100% biologisch aktiv, was durch Ligandenbindungsstudien gezeigt wurde. Dieses Material diente als Basis für weiterführende biophysikalische Experimente wie der FTIR-Differenzspektroskopie und der Röntgenstrukturanalyse.
Author: | Meike PotschiesGND |
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URN: | urn:nbn:de:hbz:294-23205 |
Referee: | Mathias LübbenGND, Matthias RögnerGND |
Document Type: | Doctoral Thesis |
Language: | German |
Date of Publication (online): | 2008/09/02 |
Date of first Publication: | 2008/09/02 |
Publishing Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek |
Granting Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Fakultät für Biologie und Biotechnologie |
Date of final exam: | 2008/07/09 |
Creating Corporation: | Fakultät für Biologie und Biotechnologie |
GND-Keyword: | G-Proteine; Rezeptor; Röntgenstrukturanalyse; FT-IR-Spektroskopie; Affinitätschromatographie |
Institutes/Facilities: | Lehrstuhl für Biophysik |
Dewey Decimal Classification: | Naturwissenschaften und Mathematik / Biowissenschaften, Biologie, Biochemie |
faculties: | Fakultät für Biologie und Biotechnologie |
Licence (German): | Keine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht |