Expression der humanen löslichen Adenylyl-Cyclase in Insektenzellen mit Hilfe des Baculovirussystems
- Es konnte die verkürzte Isoform der löslichen Adenylyl-Cyclase mit einem C-terminalen Hexahistidin-Tag erfolgreich in Insektenzellen exprimiert werden. Bei der anschließenden Reinigung wurde aktives Protein isoliert. Es wurden verschiedene Substanzen, die als Chelatoren wirken können zum anderen Substanzen, die im Docking-Screen als potenzielle Liganden für die vermutete Bicarbonat-Bindestelle identifiziert wurden, auf ihre Wirkung gegenüber der hsAC untersucht. Es konnte dabei gezeigt werden, dass nur 2-(4-Ethoxyphenyl)diazensulfonsäure und PCT einen deutlichen inhibitorischen Effekt auf die hsAC-Aktivität haben. In einem kompetitiven cAMP-Assay führte die Zugabe von hsAC-HD zu einer konzentrationsabhängigen Erhöhung der Aktivität der katalytischen Domänen. Zusätzliches Hinzufügen von DEANO, einem NO-Donor, zu hsAC-HD konnte deren aktivierende Wirkung nicht modulieren.
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| Author: | Martina LeipeltGND |
|---|---|
| URN: | urn:nbn:de:hbz:294-53594 |
| Subtitle (German): | Produktion, Reinigung, Charakterisierung |
| Referee: | Joachim RassowORCiDGND, Kornelia JaquetGND |
| Document Type: | Doctoral Thesis |
| Language: | German |
| Date of Publication (online): | 2017/08/10 |
| Date of first Publication: | 2017/08/10 |
| Publishing Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek |
| Granting Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Medizinische Fakultät |
| Date of final exam: | 2017/02/09 |
| Creating Corporation: | Medizinische Fakultät |
| Tag: | Baculoviren; Häm |
| GND-Keyword: | Cyclo-AMP; Regulation; Adenylatcyclase; Signaltransduktion; Genexpression |
| Institutes/Facilities: | Institut für Biochemie und Pathobiochemie, Abteilung Zellbiochemie |
| Dewey Decimal Classification: | Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften / Medizin, Gesundheit |
| faculties: | Medizinische Fakultät |
| Licence (German): |  Keine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht |
