Gewinnung eines Fusionsproteins von Glutathion S-Transferase und dem Genprodukt von PEX14

Durch heterologe Überexpression des Hefeproteins Pex14p in dem Bakterium \(\textit {E. coli}\) wurde das Protein Pex14p gereinigt, damit es als Antigen zur Antikörperherstellung verwendet werden konnte. Als Fusionsprotein (Glutathion S- Transferase-Pex14p) wurde es über Affinitätschromatographie in einem Schritt gereinigt. Das Fusionsprotein, das aus dem \(\textit {E. coli}\)-Stamm TG1 stammte, wurde durch präparative Gele von seinen Abbauprodukten getrennt. Somit wurde denaturiertes Protein als Antigen erhalten. Der Protease-defiziente Stamm BL21 ermöglichte eine native Aufreinigung des GST-Pex14p. Beide Fusionsproteine (jeweils aus verschiedenen Stämmen) wurden zur Immunisierung von Kaninchen eingesetzt. Von diesen Tieren konnten die Antiseren AK1 (\(\textit {E. coli}\)-Stamm TG1) und AK2 (Protease-defizienter Stamm BL21) gewonnen werden. Die Antiseren können in \(\textit {E. coli}\) das GST-Pex14p-Fusionsprotein des pGEX-Konstruktes detektieren.

Metadaten
Author:	Angelika Basu GND
URN:	urn:nbn:de:hbz:294-10959
Referee:	Wolf-Hubert Kunau GND, Jörg T. Epplen ORCiD GND
Document Type:	Doctoral Thesis
Language:	German
Date of Publication (online):	2004/08/01
Date of first Publication:	2004/08/01
Publishing Institution:	Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek
Granting Institution:	Ruhr-Universität Bochum, Medizinische Fakultät
Date of final exam:	2004/07/20
Creating Corporation:	Medizinische Fakultät
Tag:	Zellweger-Syndrom
GND-Keyword:	Affinitätschromatographie; Peroxisom; Adrenoleukodystrophie; Rekombinantes Protein; Gelelektrophorese
Institutes/Facilities:	Institut für Physiologische Chemie, Abteilung für Zellbiochemie
Dewey Decimal Classification:	Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften / Medizin, Gesundheit
faculties:	Medizinische Fakultät
Licence (German):	Keine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht

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