Neue Methoden für die gerichtete Evolution von Enzymen

  • Thema der vorliegenden Arbeit war die Entwicklung von effizienten Strategien sowie neuen, wirkungsvollen Werkzeugen für die Gerichtete Evolution von Enzymen. Die Etablierung neuer Mutagenesestrategien und deren Anwendung sowie die Ausarbeitung neuer, leistungsfähiger Methoden wurden am Beispiel der Gerichteten Evolution der Bacillus subtilis Lipasen A und B erfolgreich durchgeführt. Neben der Durchführung einer kompletten Sättigungsmutagenese wurde auch eine neue Mutagenesemethode namens Assembly of Designed Oligonucleotides (ADO) entwickelt und angewendet. Die Entwicklung von effizienten Hochdurchsatzscreening-Systemen zur Verfolgung enantioselektiver Transformationen war ein weiterer Schwerpunkt der Arbeit. Neben der Entwicklung eines achtfach-parallelen ESI-MS Assays wurde erstmals die NMR-Spektroskopie in einem Hochdurchsatz-Assay auf Enantioselektivität genutzt. Mittels Chemical Shift Imaging konnte dieser Ansatz auf einen Durchsatz von 30 000 Proben pro Tag optimiert werden.

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Metadaten
Author:Andreas EipperGND
URN:urn:nbn:de:hbz:294-6166
Referee:Manfred T. ReetzGND, Martin FeigelGND
Document Type:Doctoral Thesis
Language:German
Date of Publication (online):2003/03/18
Date of first Publication:2003/03/18
Publishing Institution:Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek
Granting Institution:Ruhr-Universität Bochum, Fakultät für Chemie und Biochemie
Date of final exam:2002/09/24
Creating Corporation:Fakultät für Chemie und Biochemie
GND-Keyword:Organische Chemie; Asymmetrische Synthese; Enzym; Mutagenese; Heubacillus
Institutes/Facilities:Max-Planck-Institut für Kohlenforschung, Mülheim an der Ruhr
Dewey Decimal Classification:Naturwissenschaften und Mathematik / Biowissenschaften, Biologie, Biochemie
faculties:Fakultät für Chemie und Biochemie
Licence (German):License LogoKeine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht