FTIR-spektroskopische Untersuchungen kleiner GTPasen

FTIR-spectroscopic investigations of small GTPases

  • In dieser Arbeit wurden die GTPasen Ran und Rap1b hinsichtlich ihres Reaktionsmechanismus mit Hilfe der trFTIR-Spektroskopie untersucht. Es wurde gefunden, dass Tyrosin 39 bei Ran das angreifende Wasser falsch positioniert. Fehlt Tyrosin 39, wird die intrinsische Hydrolyse beschleunigt; bei der GAP-katalysierten Hydrolyse hat Tyrosin 39 keine Bedeutung. Die Bande von Tyrosin 39 konnte durch Mutationsstudien und Isotopenmarkierung mittels trFTIR identifiziert und der zeitliche Ablauf während der Hydrolyse zugeordnet werden. Es wurden \(^{13}\)C\(^{15}\)N-markierte Aminosäuren mittels auxotropher \(\textit {E. coli}\)-Stämme in M9-Medium in die Proteine eingebaut. Zunächst wurden isolierte Aminosäuren und die von deren Seitenketten abgeleiteten Moleküle IR-spektroskopisch analysiert. Die Technik der Isotopenmarkierung konnte von \(\textit {E. coli}\) auf \(\textit {R. spheroides}\) übertragen werden. Bei Rap1b wurde der Einfluss des "Asparagindaumens" während der \(\it {"off"}\) nach \(\it {"on"}\) Reaktion aufgeklärt.

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Metadaten
Author:Sven BruckerGND
URN:urn:nbn:de:hbz:294-25111
Referee:Klaus GerwertORCiDGND, Helmut E. MeyerGND
Document Type:Doctoral Thesis
Language:German
Date of Publication (online):2009/04/07
Date of first Publication:2009/04/07
Publishing Institution:Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek
Granting Institution:Ruhr-Universität Bochum, Fakultät für Biologie und Biotechnologie
Date of final exam:2008/12/19
Creating Corporation:Fakultät für Biologie und Biotechnologie
GND-Keyword:GTP-Bindende Proteine; Ras-Proteine; FT-IR-Spektroskopie; Isotop / Isotopenmarkierung; Proteintransport
Institutes/Facilities:Lehrstuhl für Biophysik
Dewey Decimal Classification:Naturwissenschaften und Mathematik / Biowissenschaften, Biologie, Biochemie
faculties:Fakultät für Biologie und Biotechnologie
Licence (German):License LogoKeine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht