Klonierung, Expression und funktionelle Analyse RNA-uridylierender Enzyme
- Die posttranskriptionale Modifizierung von RNA stellt ein wichtiges Prinzip der Genexpression in Eukaryonten dar. Neben dem Spleißen, dem Capping und der Polyadenilierung haben in letzter Zeit vor allem auch Uridylierungsreaktionen ein großes Interesse erlangt. In der vorliegenden Arbeit wurde die U6-spezifische Terminal-Uridylyl-Transferase (TUTase) - nach Aufreinigung und Identifizierung durch Mikrosequenzierung - kloniert und in HeLa-Zellen exprimiert. Das rekombinante Protein wurde affinitätsgereinigt und funktionell analysiert. Es konnte gezeigt werden, dass das rekombinante Protein als TUTase aktiv ist und dieselbe Substratspezifität wie das zelluläre Enzym zeigt. Außerdem wurde die rekombinante U6-spezifische TUTase im Vergleich zu einer unspezifischen TUTase untersucht, wobei unterschiedliche RNA Substrate eingesetzt wurden.
Author: | Elena GuschinaGND |
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URN: | urn:nbn:de:hbz:294-22528 |
Referee: | Bernd-Joachim BeneckeGND, Christian HerrmannORCiDGND, William S. SheldrickGND |
Document Type: | Doctoral Thesis |
Language: | German |
Date of Publication (online): | 2008/06/30 |
Date of first Publication: | 2008/06/30 |
Publishing Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek |
Granting Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Fakultät für Chemie und Biochemie |
Date of final exam: | 2007/06/06 |
Creating Corporation: | Fakultät für Chemie und Biochemie |
GND-Keyword: | Ribozym; RNS; Rekombinantes Protein; Chemische Affinität / Aufreinigung; Substrat (Chemie) |
Institutes/Facilities: | Lehrstuhl Biochemie I, Rezeptorbiochemie |
Dewey Decimal Classification: | Naturwissenschaften und Mathematik / Chemie, Kristallographie, Mineralogie |
faculties: | Fakultät für Chemie und Biochemie |
Licence (German): | Keine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht |