Biochemische und biophysikalische Charakterisierung von CRYPTOCHROMEN als circadiane Photorezeptoren, integrale Uhrenproteine und Magnetorezeptoren

  • Cryptochrome sind Flavoproteine, die im Gegensatz zu phylogenetisch verwandten DNA-Reparaturenzymen Photolyasen die Rolle circadianen Blaulichtrezeptoren, integralen Uhrenproteine und Magnetorezeptoren übernehmen. Im Rahmen der vorliegenden Arbeit wurden Maus-Cryptochrome (mCRY1,2) sowie deren mit BMAL1 interagierende Fragmente mittels \(\textit {E. coli-}\) bzw. Baculovirussysteme heterolog exprimiert und Präparationsprotokolle etabliert. Mit Hilfe der Interaktionsstudien wurden die Komplexe der C-terminalen Fragmente von BMAL1 und mCRY1/2 kinetisch analysiert. Mittels massenspektrometrischen und spektroskopischen Untersuchungen an Drosophila-Cryptochrom (dCRY) konnte das nicht-kovalent gebundene Flavinchromophor in seiner oxidierten Form und als ein stabiles Pterin-Kofaktor ein 10-Formyldihydrofolat quantifiziert werden. Das Zusammenspiel der absorptionsspektroskopischen und zeitaufgelösten Fluoreszenz-Messungen erlaubte erweiterte Charakterisierung des bereits postulierten Photozyklus.

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Metadaten
Author:Helena BreitkreuzGND
URN:urn:nbn:de:hbz:294-23263
Referee:Eva WolfGND, William S. SheldrickGND
Document Type:Doctoral Thesis
Language:German
Date of Publication (online):2008/09/03
Date of first Publication:2008/09/03
Publishing Institution:Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek
Granting Institution:Ruhr-Universität Bochum, Fakultät für Chemie und Biochemie
Date of final exam:2008/04/25
Creating Corporation:Fakultät für Chemie und Biochemie
GND-Keyword:Maus / Cryptochrom; Blaulicht / Rezeptor; Tagesrhythmen; Transkriptionsfaktor; Baculoviren / Genexpression
Institutes/Facilities:Max-Planck-Institut für molekulare Physiologie, Dortmund, Abteilung "Strukturelle Biologie"
Dewey Decimal Classification:Naturwissenschaften und Mathematik / Chemie, Kristallographie, Mineralogie
faculties:Fakultät für Chemie und Biochemie
Licence (German):License LogoKeine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht