Biochemische und biophysikalische Charakterisierung von CRYPTOCHROMEN als circadiane Photorezeptoren, integrale Uhrenproteine und Magnetorezeptoren
- Cryptochrome sind Flavoproteine, die im Gegensatz zu phylogenetisch verwandten DNA-Reparaturenzymen Photolyasen die Rolle circadianen Blaulichtrezeptoren, integralen Uhrenproteine und Magnetorezeptoren übernehmen. Im Rahmen der vorliegenden Arbeit wurden Maus-Cryptochrome (mCRY1,2) sowie deren mit BMAL1 interagierende Fragmente mittels \(\textit {E. coli-}\) bzw. Baculovirussysteme heterolog exprimiert und Präparationsprotokolle etabliert. Mit Hilfe der Interaktionsstudien wurden die Komplexe der C-terminalen Fragmente von BMAL1 und mCRY1/2 kinetisch analysiert. Mittels massenspektrometrischen und spektroskopischen Untersuchungen an Drosophila-Cryptochrom (dCRY) konnte das nicht-kovalent gebundene Flavinchromophor in seiner oxidierten Form und als ein stabiles Pterin-Kofaktor ein 10-Formyldihydrofolat quantifiziert werden. Das Zusammenspiel der absorptionsspektroskopischen und zeitaufgelösten Fluoreszenz-Messungen erlaubte erweiterte Charakterisierung des bereits postulierten Photozyklus.
Author: | Helena BreitkreuzGND |
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URN: | urn:nbn:de:hbz:294-23263 |
Referee: | Eva WolfGND, William S. SheldrickGND |
Document Type: | Doctoral Thesis |
Language: | German |
Date of Publication (online): | 2008/09/03 |
Date of first Publication: | 2008/09/03 |
Publishing Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek |
Granting Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Fakultät für Chemie und Biochemie |
Date of final exam: | 2008/04/25 |
Creating Corporation: | Fakultät für Chemie und Biochemie |
GND-Keyword: | Maus / Cryptochrom; Blaulicht / Rezeptor; Tagesrhythmen; Transkriptionsfaktor; Baculoviren / Genexpression |
Institutes/Facilities: | Max-Planck-Institut für molekulare Physiologie, Dortmund, Abteilung "Strukturelle Biologie" |
Dewey Decimal Classification: | Naturwissenschaften und Mathematik / Chemie, Kristallographie, Mineralogie |
faculties: | Fakultät für Chemie und Biochemie |
Licence (German): | Keine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht |