Development of approaches for the engineering of gene expression in the protozoa \(\textit {Leishmania tarentolae}\)
Entwicklung von Methoden zur Manipulation der Genexpression im Protozoon \(\textit {Leishmania tarentolae}\)
- Um ein hohes Niveau der Überexpression heterologer Proteine in \(\textit {L. tarentolae}\) zu erreichen, bestand der Ansatz in der Steigerung der Menge heterologer mRNA. Dies sollte entweder durch eine Reduktion der Abbau- oder eine Steigerung der Produktionsrate der mRNA geschehen. Die Reduktion der Abbaurate basiert auf dem derzeit aktuellen Modell der Genexpression der \(\it {Trypanosomatidae}\), für welche angenommen wird, dass die 3´UTR des proteinkodierenden Gens die Stabilität der mRNA bestimmen. Dazu wurden zufällig ausgewählte Sequenzen aus dem \(\textit {L. tarentolae}\)-Genom auf ihre Eignung als 3´UTR eines proteinkodierenden Gens zu funktionieren überprüft. In einem zweiten Ansatz konnte eine Erhöhung in der mRNA-Produktion durch eine Steigerung der Kopienzahl transkribierter Gene erreicht werden. Zu diesem Zweck wurde der induzierbare \(\textit {L. tarentolae}\) Stamm genutzt. Dazu wurde ein artifizielles Episom für induzierbare Proteinexpression konstruiert.
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| Author: | Ion Cristian CirsteaGND |
|---|---|
| URN: | urn:nbn:de:hbz:294-19903 |
| Referee: | Roger S. GoodyGND, Mathias LübbenGND |
| Document Type: | Doctoral Thesis |
| Language: | English |
| Date of Publication (online): | 2007/08/08 |
| Date of first Publication: | 2007/08/08 |
| Publishing Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek |
| Granting Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Fakultät für Biologie und Biotechnologie |
| Date of final exam: | 2007/04/20 |
| Creating Corporation: | Fakultät für Biologie und Biotechnologie |
| GND-Keyword: | Plasmid; Trypanosomen; Messenger-RNS; Heterologe Genexpression; Strukturelle Stabilität |
| Institutes/Facilities: | Max-Planck-Institut für molekulare Physiologie, Dortmund, Abteilung III , Physikalische Biochemie |
| Dewey Decimal Classification: | Naturwissenschaften und Mathematik / Biowissenschaften, Biologie, Biochemie |
| faculties: | Fakultät für Biologie und Biotechnologie |
| Licence (German): |  Keine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht |
