Die lipolytischen Enzyme LipA und LipB von \(\textit {Bacillus subtilis}\)
- Die extrazellulären lipolytischen Enzyme von \(\textit {Bacillus subtilis}\) wurden charakterisiert sowie deren biotechnologisches Potential zur Synthese chiraler Verbindungen in einem gerichteten Evolutionsprojekt untersucht. Ein potentielles Lipasegen \(\it {(lipB)}\) wurde kloniert und das korrespondierende Protein gereinigt. LipB konnte als extrazelluläre Esterase mit hoher Alkalistabilität klassifiziert werden. Darüber hinaus konnte dem Alaninrest im Ala-X-Ser-X-Gly-Motif eine essentielle Bedeutung für die Aktivität und Alkalistabilität zugeschrieben werden. Untersuchungen zur Regulation zeigten für LipA und LipB eine differentielle Genexpression, die durch verschiedene Medienkomponenten beeinflußt wurde. Durch gerichtete Evolution konnte die Enantioselektivität von LipA in der Hydrolyse eines Modellsubstrats von 38% \(\it{ee}\) für das Wildtyp-Enzym auf 70% \(\it {ee}\) für die beste Variante gesteigert werden. Da die Proteinstruktur bekannt war konnten strukturelle Grundlagen der Enantioselektivität aufgeklärt werden.
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| Author: | Thorsten EggertGND |
|---|---|
| URN: | urn:nbn:de:hbz:294-4223 |
| Subtitle (German): | Charakterisierung und Optimierung mit gerichteter Evolution |
| Referee: | Karl-Erich JägerGND, Elmar W. WeilerGND |
| Document Type: | Doctoral Thesis |
| Language: | German |
| Date of Publication (online): | 2003/03/18 |
| Date of first Publication: | 2003/03/18 |
| Publishing Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek |
| Granting Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Fakultät für Biologie und Biotechnologie |
| Date of final exam: | 2001/12/19 |
| Creating Corporation: | Fakultät für Biologie und Biotechnologie |
| GND-Keyword: | Heubacillus; Lipasen; Esterasen; Genregulation; Enantioselektivität |
| Institutes/Facilities: | Lehrstuhl für Biologie der Mikroorganismen |
| Dewey Decimal Classification: | Naturwissenschaften und Mathematik / Biowissenschaften, Biologie, Biochemie |
| faculties: | Fakultät für Biologie und Biotechnologie |
| Licence (German): |  Keine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht |
