Identifizierung und Charakterisierung von 7S K RNA-bindenden Proteinen

Durch zwei experimentelle Ansätze wurden Proteine isoliert, die die humane 7S K RNA binden. Im ersten Ansatz wurde die Interaktion eines Teils der 7S K RNA mit Zellextrakt-Proteinen charakterisiert. Durch EMSAs mit Mutanten wurde die spezifische Bindung eines 40 kDa-Proteins belegt. Durch ein Chromatographieschema wurde dieses Protein aus Maus-Kernextrakt angereichert. Im zweiten Ansatz wurden cDNAs der Proteine SRp40 und SCAF4 als 7S K RNA-bindende Proteine durch ein RNA-Liganden-Screening aus einer cDNA-Bibliothek isoliert. Beide Proteine wurden rekombinant in E. coli exprimiert und deren Bindung an die 7S K RNA in EMSAs bestätigt. Ein polyklonales Antiserum wurde erzeugt, das in Zellextrakten spezifisch SCAF4 detektiert. In fraktionierten Kernextrakten wurde ein 27 S 7S K RNA nachgewiesen. Mit dem Antiserum konnte ausgeschlossen werden, daß SCAF4 einen Bestandteil ist. Dennoch zeigten Immunpräzipitationen, daß SCAF4 im Kernextrakt an die 7S K RNA assoziiert vorliegt.

Metadaten
Author:	Hendrik Mittendorf GND
URN:	urn:nbn:de:hbz:294-4507
Referee:	Bernd-Joachim Benecke GND, Michael Hollmann ORCiD GND, Martin Feigel GND
Document Type:	Doctoral Thesis
Language:	German
Date of Publication (online):	2003/03/18
Date of first Publication:	2003/03/18
Publishing Institution:	Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek
Granting Institution:	Ruhr-Universität Bochum, Fakultät für Chemie und Biochemie
Date of final exam:	2002/02/07
Creating Corporation:	Fakultät für Chemie und Biochemie
GND-Keyword:	Proteine; Proteinbindung; Chromatographie; RNS / Ligand (Biochemie) / Sreening (Chemie)
Institutes/Facilities:	Lehrstuhl für Biochemie I
Dewey Decimal Classification:	Naturwissenschaften und Mathematik / Biowissenschaften, Biologie, Biochemie
faculties:	Fakultät für Chemie und Biochemie
Licence (German):	Keine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht

RUB » Bibliotheksportal