Darstellung, spektroskopische und strukturelle Charakterisierung des Uhrenproteins und Blaulicht-Photorezeptors Cryptochrom

  • Cryptochrome sind ubiquitäre, FAD-haltige Blaulichtrezeptoren und zirkadiane Uhrenproteine mit deutlichen Homologien zu DNA-Photolyasen. Diese Arbeit zeigt die Reindarstellung des zirkadianen Blaulichtphotorezeptors \(\it {Drosophila}\)-Cryptochrom (dCRY) aus Sf21-Zellen mit dem Ziel der Strukturaufklärung durch Röntgenstrukturanalyse. Unter Verwendung von Synchrotronstrahlung ließen sich erste Datensätze von dCRY-Kristallen bis zu einer Auflösung von 3.1 Å sammeln. Die absorptionsspektroskopische Analyse von dCRY zeigte, daß das nicht-kovalent gebundene Flavinchromophor nach der Reindarstellung des Photorezeptors in der oxidierten Form auftrat und die Proteinpopulation nur zu einem Drittel beladen vorlag. Im UV-VIS Spektrum ließen sich charakteristische, lichtabhängige Veränderungen im Absorptionsverhalten zeigen, die auf einen physiologisch relevanten Photozyklus dieses Blaulichtrezeptors hindeuten. Fluoreszenzspektroskopische Untersuchungen deuten auf Spuren des zweiten Chromophors, MTHF.

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Metadaten
Author:Alexander BerndtGND
URN:urn:nbn:de:hbz:294-17345
Referee:Alfred WittinghoferGND, Rolf HeumannORCiDGND
Document Type:Doctoral Thesis
Language:German
Date of Publication (online):2006/10/02
Date of first Publication:2006/10/02
Publishing Institution:Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek
Granting Institution:Ruhr-Universität Bochum, Fakultät für Chemie und Biochemie
Date of final exam:2005/07/21
Creating Corporation:Fakultät für Chemie und Biochemie
GND-Keyword:Deoxyribodipyrimidin-Photolyase; Photorezeptor; Tagesrhythmus; Chronobiologie; Biologische Uhr
Institutes/Facilities:Max-Planck-Institut für molekulare Physiologie, Dortmund, Abteilung "Strukturelle Biologie"
Dewey Decimal Classification:Naturwissenschaften und Mathematik / Chemie, Kristallographie, Mineralogie
faculties:Fakultät für Chemie und Biochemie
Licence (German):License LogoKeine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht